QUY TRÌNH KIỂM VI SINH

QUY TRÌNH KIỂM VI SINH TIÊU CHUẨN (NEOGEN VIETNAM)

+ TPC (TỔNG VI SINH HIẾU KHÍ), E.COLI, SALMONELLA, COLIFORM, LISTERIA, STAPHYLOCOCCUS, ENTERO, VIBRIO, NẤM MEN, NẦM MỐC.

+ ISO 4833:2003, ISO 6222: 1999, ISO 4832:2006, ISO 4831 - 2006, ISO 9308-1: 2000 / TCVN 6187:2009, ISO 9309-1990 / TCVN 6187-2006, ISO 7251:2005, ISO 16649:2001, ISO 6887, ISO 8199, ISO 9309-2000 / TCVN 6187-2009, ISO 9309-1990 / TCVN 6187-2006, NMKL 125-2005, ISO 21567:2004, ISO 6579:2002, NMKL 144: 2005, ISO 6888:1999, ISO 6888:2004, ISO 21527:2008

1. QUY TRÌNH PHA LOÃNG MẪU
QUY TRÌNH PHA LOÃNG MẪU		Code MERCK	NEOGEN
Saline peptone water SPW (Maximum reocevery Diluent)		1,125,350,500
Buffer peptone water		1,072,280,500
2. DANH MỤC HÓA CHẤT KIỂM TPC - TỔNG VI SINH HIẾU KHÍ
TRONG THỰC PHẨM - ISO 4833:2003		Code MERCK	NEOGEN
Saline peptone water SPW (Maximum reocevery Diluent)		1,125,350,500
Plate Count Agar (PCA)		1,054,630,500
TRONG MÔI TRƯỜNG NƯỚC ISO 6222: 1999
Saline peptone water SPW (Maximum reocevery Diluent)		1,125,350,500
Yeast extract agar – YEA		1,131,160,500
3. DANH MỤC HÓA CHẤT KIỂM COLIFORM
TRONG THỰC PHẨM ISO " PHƯƠNG PHÁP ĐỖ ĐĨA": ISO 4832:2006			NEOGEN
Saline peptone water (Maximum reocevery medium)	SPW	1,125,350,500
Violet Red Bile Agar	VRB	1,014,060,500
Brillant-green 2 %-Bile Broth (Brila broth)	BGBL	1,054,540,500
COLIFORM PHƯƠNG PHÁP NHIỀU ỐNG "KỸ THUẬT MPN" : ISO 4831 - 2006
Saline peptone water (Maximum reocevery medium)	SPW	1,125,350,500
Lauryl Sulfate Broth	LSB (LST)	1,102,660,500
Brillant-green 2 %-Bile Broth (Brila broth)	BGBL	1,054,540,500
TRONG MÔI TRƯỜNG NƯỚC ISO 9308-1: 2000 / TCVN 6187:2009
Lactose TTC agar	TTC 7	1,07680,0500
Tryptone Soya agar – TSA	TSA	1,05458,0500
Thuốc thử Kovacs’		1,09293,0100
Tryptone water		1,10859,0500
COLIFORM CHỊU NHIỆT TRONG MÔI TRƯỜNG NƯỚC			NEOGEN
ISO 9309-1990 / TCVN 6187-2006 "PP Đếm Khuẩn lạc MPN"
Pha loãng mẫu theo ISO 8199
Lactose Broth "Chọn 1 trong 3"--> Ủ 21h		1,076,610,500
MacConkey Broth "Chọn 1 trong 3"--> Ủ 21h		1,053,960,500
Lauryl Tryptone Broth "Chọn 1 trong 3"--> Ủ 21h		1,106,870,500
KQ âm tính --> Ủ 48h --> Sinh Khí ( KQ Dương tính cho qua)
EC medium (EC Broth) --> 24h--> Sinh Khí		1,107,650,500
Tryptone water --> 24h		1,108,590,500
Kiểm tra sinh hóa
+ Sinh Khí
+ Bactident Oxidase (+)		1,113,500,001
4. DANH MỤC HÓA CHẤT KIỂM E.COLI (ESCHERICHIA COLI)
ESCHERICHIA COLI TRONG THỰC PHẨM ISO 7251:2005 " KỸ THUẬT MPN"			NEOGEN
Pha loãng ISO 6887
Saline peptone water (maximum recovery diluent)	SPW	1,125,350,500
Lauryl Sulfate broth --> 24-48h --> Sinh hơi	LSB(LST)	1,102,660,500
EC Broth --> 24-48h --> Sinh hơi	EC	1,107,650,500
Peptone water--> 48h		1,072,280,500
Kiểm tra Indole
+ Kovac's indole (+)		1,092,930,100
+ Bactident indole (+)		1,113,500,001
KIỂM NHANH 24H - ESCHERICHIA COLI TRONG THỰC PHẨM			NEOGEN
ISO 16649:2001 " ĐẾM KHUẨN LẠC"
Pha loãng theo ISO 6887
Saline peptone water (Maximum reocevery medium)	SPW	1,125,350,500
Tryptone bile X-glucuronide agar --> 21H	TBX	1,161,220,500
Đếm trực tiếp trên đĩa
E.COLI TRONG MÔI TRƯỜNG NƯỚC ISO 9309-2000 / TCVN 6187-2009			NEOGEN
Pha loãng theo ISO 8199 và ISO 6887
Tryptic Soy Agar --> 4-5h	TSA	1,054,580,500
Chromocult TBX --> 19-20h	TBX	1,161,220,500
Kiểm tra sinh hóa
+ Kovac's indole (+)		1,092,930,100
+ Bactident indole(+)		1,113,500,001
E.COLI CHỊU NHIỆT TRONG MÔI TRƯỜNG NƯỚC			NEOGEN
ISO 9309-1990 / TCVN 6187-2006 "PP Đếm Khuẩn lạc MPN"
Pha loãng mẫu theo ISO 8199
Lactose Broth "Chọn 1 trong 3"--> Ủ 21h		1,076,610,500
MacConkey Broth "Chọn 1 trong 3"--> Ủ 21h		1,053,960,500
Lauryl Tryptone Broth "Chọn 1 trong 3"--> Ủ 21h		1,106,870,500
KQ âm tính --> Ủ 48h --> Sinh Khí ( KQ Dương tính cho qua)
EC medium (EC Broth) --> 24h--> Sinh Khí		1,107,650,500
Tryptone water --> 24h		1,108,590,500
Kiểm tra sinh hóa
+ Sinh Khí
+ Bactident Indole (+)		1,113,500,001
+ Kovac's Indole (+)		1,09293,0500
PHÂN BIỆT E.COLI VÀ COLIFORM CHỊU NHIỆT			Neogen
TRONG THỰC PHẨM : NMKL 125-2005
Saline peptone water (Maximum reocevery medium)	SPW	1,125,350,500
Tryptone soya agar --> 1-2h	TSA	1,05458,0500
Violet Red Bile Agar --> 24h	VRB	1,014,060,500
TH1: KHẲNG ĐỊNH COLIFORM
EC broth --> 24h --> Sinh Khí	EC	1,107,650,500
TH2: KHẲNG ĐỊNH E.COLI
EC Broth --> 24h -->Dương tính
Tryptone broth --> 24h		1,105,890,500
+ Aceton, Chloroform 2-3 giọt
+ Thuốc thử Kovac's indole (+)
5. KIỂM NHANH E.COLI VÀ COLIFORMS TRONG 24H
6. DANH MỤC HÓA CHẤT KIỂM SHIGELLA spp
SHIGELLA spp TRONG THỰC PHẨM ISO 21567:2004			NEOGEN
Shigella Broth + Novobiocin --> 18h " Chọn 1 trong 2"		M1326
GN Enrichment Broth acc. to HAJNA --> 18h " Chọn 1 trong 2"		1.107.560.500
Thêm 0,5 µg/ml of novobiocin
Cấy trên 3 môi trường cùng thời điểm --> 22h
+ MacConkey	MC	1.054.650.500
+ XLD Agar	XLD	1.052.870.500
+ hektoen Enteric Agar	HE	1.116.810.500
Nutrient agar --> 24h " Chọn 1 trong 2"	NA	105.450.500
Trypic Soy Agar --> 18h " Chọn 1 trong 2"	TSA
Kiểm tra sinh hóa
Triple Sugar Iron Agar (-): Glucose; H2S (-)	TSI	1,039,150,500
L-Lysine decarboxylase (-)		1.057.000.100
Ure (-)
Indole (-)
+ Tryptone (peptone from casein)
+ Kovac's indole
6. DANH MỤC HÓA CHẤT KIỂM SALMONELLA
SALMONELLA spp TRONG THỰC PHẨM ISO 6579:2002			NEOGEN
Buffered Peptone Water -->18h	BPW	1.072.280.500
Rappaport-VASSILIADIS Broth --> 24h " Chọn 1 trong 2"	RVs	1.077.000.500
Muller Kaufmann Tetrathionate-novobiocin --> 24h " Chọn 1 trong 2"	MKTTn	1.058.780.500
Hektoen enteric agar --> 24h " Chọn 1 trong 3": Có màu XANH
Brilliant-green Phenol-red Lactose Sucrose --> Chọn 1 trong 3": Có màu XANH
Xylose Lysine Deoxycholate Agar --> 24h " Chọn 1 trong 3": Có Màu Đỏ	XLD	1.052.870.500
Nutrient agar --> 24h " Chọn 1 trong 2"		1.054.500.500
Trypic Soy Agar --> 18h " Chọn 1 trong 2"	TSA
Kiểm tra sinh hóa --> 24h
Triple Sugar Iron Agar (+): Glucose--> 95%; H2S (+)--> 92%	TSI	1.039.150.500
L-Lysine decarboxylase (+) -->97%	LDC	1.057.000.100
Ure (-) --> 99%
Indole (-) --> 99%
+ Tryptone (peptone from casein)
+ Kovac's indole
Thử nghiệm thêm kháng huyết thanh khi cần thiết
Kháng huyết thanh Salmonella O đa giá
Kháng huyết thanh Salmonela H đa giá
Kháng huyết thanh Sallmonella Vi
7. DANH MỤC HÓA CHẤT KIỂM ENTEROBACTERIACEAE
ENTEROBACTERIACEAE TRONG THỰC PHẨM THEO NMKL 144: 2005			NEOGEN
Saline peptone water (Maximum reocevery Diluent)	SPW	1.12535.0500
Violet Red Bile Dextrose Agar = VRBG	VRBD	1.10275.0500
Tryptone soya Agar	TSA	1.054.580.500
Oxidase regent		1.13300.0001
8. DANH MỤC HÓA CHẤT KIỂM STAPHYLOCOCCUS
STAPHYLOCOCCUS TRONG THỰC PHẨM ISO 6888:1999			NEOGEN
Mẫu --> pha loãng theo ISO 6887 "Saline Peptone water"	SPW	1.12535.0500
Baird Parker --> 24h	BP	1,05406,0500
BHI --> 24h	BHI	1104930500
Test sinh hóa = Rabbit plasma		1133060001
+ Coagulase (+)
STAPHYLOCOCCUS TRONG THỰC PHẨM ISO 6888:2004			NEOGEN
Mẫu --> pha loãng theo ISO 6887 "Saline Peptone water"	SPW	1.12535.0500
Giolitti and Cantoni broth --> 24h		1.106.750.500
Baird parker --> 24h	BP	1054060500
BHI --> 24h	BHI	1104930500
Test sinh hóa = Rabbit plasma		1133060001
+ Coagulase (+)
9. DANH MỤC HÓA CHẤT KIỂM NẤM MEN - NẤM MỐC
PP ĐẾM NẤM MEN - NẤM MỐC ISO 21527:2008			NEOGEN
(MẪU CÓ HOẠT TÍNH NƯỚC > 0.95)
Saline peptone water SPW (Maximum reocevery Diluent)		1.12535.0500
Dichloran Rose Bengal Chloramphenicol Agar (DRBC)		1.00466.0500
Dichloran Glycerol Agar (DG18)		1.00465.0500
LISTERIA MONOCYTOGENES THEO ISO 11290:1996
1. PP ĐỊNH DANH (ISO 11290:1996) - 2, PP ĐẾM KHUẨN LẠC (ISO 11290:1998)			Neogen
Fraser listeria Selective Erichment Borth (Base)		1103980500
Fraser listeria Selective Supplement		1000930010
Fraser listeria Ammonium Iron(III) Supplement		1000920010
Chọn 1 trong 3: ALOA --> 24 - 48h		1004270500
Chọn 1 trong 3: Oxford --> 24 - 48h		1070040500
Chọn 1 trong 3: Palcam --> 24 - 48h		1117550500
TSYEA --> 21h		1004540500
Kiểm tra sinh hóa